La liaison d’un composé aux protéines biologiques influence directement sa distribution, son élimination et sa fraction libre active. Notre plateforme propose plusieurs modèles de dialyse à l’équilibre pour évaluer la fraction libre dans différentes matrices biologiques (plasma, microsomes, tissus). Ces essais sont réalisés avec le système HTDialysis, permettant une mesure précise, reproductible et à haut rendement.
Liaison aux protéines plasmatiques
Conditions : Incubation du composé (1 µM ou autre concentration sur demande) dans du plasma à différentes concentrations (100 %, 50 %, 10 %), dialysé contre un tampon pendant 5 h à 37 °C, 5 % CO₂ (n=3)
Contrôle de solubilité ou de liaison non spécifique : Incubation tampon contre tampon à 10 % de la concentration testée
Espèces : Humain, souris, rat, chien, singe, autres sur demande
Alternatives : Pour les composés instables dans le plasma, possibilité d’incubation avec albumine sérique humaine (HSA) ou α₁-acidoglycoprotéine
Contrôle : Propranolol
Résultat : Fraction libre plasmatique
Liaison aux protéines microsomales
Conditions : Incubation du composé (1 µM) dans des microsomes hépatiques (0,5 mg/mL ou autre), dialysé contre tampon pendant 5 h à 37 °C, 5 % CO₂ (n=3)
Contrôle de solubilité/non-spécificité : Tampon contre tampon à 10 % de la concentration testée
Espèces : Humain, souris, rat, chien, singe, autres sur demande
Contrôle : Propranolol
Résultat : Fraction libre microsomale
Liaison aux protéines dans les tissus (homogénats)
Conditions : Incubation du composé (1 µM) dans des homogénats de tissus (souris ou rat), dialysé contre tampon pendant 5 h à 37 °C, 5 % CO₂ (n=3)
Contrôle de solubilité/non-spécificité : Tampon contre tampon à 10 % de la concentration testée
Espèces : Souris, rat, autres sur demande
Contrôle : Midazolam
Résultat : Fraction libre tissulaire, corrigée selon le facteur de dilution